Выяснилось, например, что яйца морского ежа при центрифугировании делятся на две половины, одна из которых содержит ядро, а другая — митохондрии. После такого разделения можно было провести раздельный энзим этический и цитологический анализы обеих половин. При центрифугировании амебы происходит удлинение клетки и расслоение клеточного содержимого. Из амебы, подвергнутой центрифугированию, удалось приготовить срезы и установить зависимость между ферментативной активностью отдельных срезов и содержанием в них митохондрий. Методика Линдерштрем-Ланга была использована также для определения ферментативной активности отмеренных количеств ядерного вещества, извлеченных из ядер лягушечьих яиц при помощи микропипетки.
Совершенно очевидно, что метод Линдерштрем-Ланга имеет лишь ограниченное применение. Так, изучение внутриклеточного распределения ферментов можно было провести лишь на одноклеточных организмах. Метод, по-видимому, не был использован для исследования отдельных клеток тканей млекопитающих. Следует подчеркнуть, кроме того, что заключения о распределении ферментов внутри клетки при помощи этого метода делаются на основе корреляции между ферментативной активностью и видимыми под микроскопом компонентами клетки. Поэтому значительно больший интерес представляет применение этих исследований для прямого определения ферментативной активности клеточных компонентов, выделенных из отдельных клеток.
Наиболее удобным способом исследования распределения ферментов в клетках является так называемый метод фракционирования клеток. Клетки определенного участка ткани разрушаются механическим путем (в ступке или гомогенизаторе), что вызывает освобождение клеточного содержимого. Различные структурные элементы клетки могут быть затем выделены путем последовательного центрифугирования при возрастающих скоростях. Ядра, являясь самыми крупными по объему и самыми плотными клеточными компонентами, оседают при малых скоростях.
Гистохимический метод | Освобождение клеточного содержимого
Для вас!
Это интересно!
Читайте также
Насколько полезна была статья:
(No Ratings Yet)
Загрузка...