Для изолирования клеточных ядер печени была применена и другая методика. Печень замораживалась, после чего ее клетки разрушались в гомогенизаторе в разбавленном растворе лимонной кислоты. Освобожденные ядра отделялись затем при помощи дифференциального центрифугирования. Было найдено, что концентрация аргиназы в ядрах составляет приблизительно 45% концентрации фермента в цельной печени. Цитохромоксидаза, эстераза, апофермент лактикодегидраза и кислая фосфатаза присутствуют в изолированных ядрах и цельной печени примерно в одинаковых количествах, в то время как концентрация щелочной фосфатазы в ядрах приблизительно в 2 раза выше, чем в цельной ткани печени. Каталаза, сукциндегидраза, цитохром с, ДПН и рибофлавин в ядрах печени либо полностью отсутствуют, либо содержатся в очень незначительных количествах. Те же исследования были затем продолжены с целью изучения оксидазы — аминокислот и уриказы. Было установлено, что эти. ферменты содержатся в ядре в тех же или в несколько более высоких концентрациях, чем в цельной печени. Несколько позже было обнаружено, что ядра, выделенные из печени или почек, обнаруживают альдолазную активность, которая составляет приблизительно 40% активности соответствующих цельных тканей. При помощи методики Тунберга удалось показать наличие сукциндегидразной и лактикодегидразной активности в изолированных ядрах печени, выделенных тем же методом. При фракционировании печени крысы были получены фракция ядер, фракция крупных гранул, или митохондрий, и не фракционированный остаток. Ядерная фракция содержала все ядра исходной печеночной ткани, но вместе с тем и некоторое количество крупных гранул. В соответствии с ранее полученными данными концентрация цитохромоксидазы в ядерной фракции составляет 53% концентрации фермента в цельной ткани, что соответствует лишь 5% всей цитохромоксидазной активности печени.
Детали метода изолирования | Освобожденные ядра
Для вас!
Это интересно!
Читайте также
Насколько полезна была статья:
(No Ratings Yet)
Загрузка...