При больших скоростях оседают митохондрии, а вслед за ними, при дальнейшем увеличении скорости вращения, — субмикроскопические частицы. Если клеточные оболочки разрушены растиранием с мелким песком или измельчением в гомогенизаторе, то освобождаются и хромосомы, которые могут быть также выделены путем фракционированного центрифугирования. Детали метода изолирования имеются в работах. Одним из преимуществ метода фракционирования клетки является возможность получения практически любого количества данной фракции в чистом виде. Несмотря на то, что указанным способом можно изучить многие ферменты, он не лишен некоторых недостатков. Во-первых, исследованию подвергается не один тип клеток, а несколько, так как для опыта берут целый участок ткани. Этот недостаток можно устранить, выбирая ткани, состоящие почти исключительно из одного типа клеток. Далее, само разрушение клеточных оболочек может явиться источником артефактов, например адсорбции или освобождения ферментов или иных веществ отдельными клеточными компонентами, а также образования морфологически оформленных элементов.
Вопрос о том, в какой мере имеют место явления адсорбции и освобождения ферментов, можно решить путем отмывания соответствующих изолированных компонентов клетки различными растворами, а идентичность изолированного материала должна быть проверена тщательными цитологическими исследованиями/;
Этот краткий обзор методов изучения внутриклеточного распределения ферментов показывает, что ни один из них не свободен от недостатков и не может быть принят без известных оговорок. Очевидно также, что сомнения, которые могут возникнуть при применении какого-либо одного из методов, разрешимы путем применения других методов исследования. Надо надеяться, что в дальнейшем исследование одного и того же фермента будет проводиться при помощи нескольких различных методов.
Определение ферментативной активности фракций, полученных из большого количества разрушенных клеток | Детали метода изолирования
Для вас!
Это интересно!
Читайте также
Насколько полезна была статья:
(No Ratings Yet)
Загрузка...